荧光定量PCR检测肺炎链球菌感染方法的建立

作     者：王良玉 郭东星 蔚然 辛德莉 WANG Liang-yu GUO Dong-xing WEI Ran XIN De-li

作者机构：首都医科大学附属北京友谊医院北京100050 北京热带医学研究所北京100050 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(编号:81271890) 

出 版 物：《中国妇幼健康研究》 (Chinese Journal of Woman and Child Health Research)

年 卷 期：2016年第27卷第10期

页      码：1184-1186页

摘      要：目的建立Taqman探针法荧光定量PCR检测肺炎链球菌感染的实验室诊断方法。方法针对肺炎链球菌自溶素基因设计引物及探针,建立荧光定量PCR Taqman探针法检测肺炎链球菌感染。采用肺炎链球菌标准株,构建质粒,用质粒构建标准品,扩增标准品,绘制标准曲线并检验新建荧光定量PCR的敏感性,采用本实验冻存其他菌DNA样本,检测其特异性;采集2015年9月至2015年12月份北京地区家5家医院儿童门诊或病房,诊断为呼吸道感染患儿的咽拭子标本133例,对新建荧光定量PCR法进行临床样本的验证。结果绘制了荧光定量PCR Taqman探针法检测肺炎链菌感染的标准曲线;新建荧光定量PCR可检测的肺炎链球菌最低拷贝数为10copies/μL;新建荧光定量PCR可成功区分几种病原体DNA,具有较好特异性;采用新建荧光定量PCR检测临床样本132例,其中肺炎链球菌阳性25例,阳性率为18.94%。结论新建立的荧光定量PCR检测肺炎链球菌感染的实验室诊断方法具有较高的敏感性和特异性,可用于临床样本的检验。

主 题 词：肺炎链球菌 儿童呼吸道感染 实验室诊断方法 荧光定量PCR 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100202[100202] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-5293.2016.10.006

馆 藏 号：203208647...