针对DNMT3多靶点siRNA的构建及对肾细胞癌786-0细胞的影响

作     者：梁亮 闫召峰 高杨 赵华才 申俊龙 孙羿 程永毅 Liang Liang;Yan Zhaofeng;Gao Yang;Zhao Huacai;Shen Junlong;Sun Yi;Cheng Yongyi

作者机构：陕西省人民医院泌尿外科陕西西安710068 靖边县人民医院泌尿外科陕西榆林718500 

基　　金：国家自然科学基金青年项目(编号:81502205) 陕西省自然基础研究计划青年项目(编号:2014JQ4157) 

出 版 物：《现代肿瘤医学》 (Journal of Modern Oncology)

年 卷 期：2016年第24卷第24期

页      码：3891-3896页

摘      要：目的:设计、验证针对DNA甲基化转移酶3家族同源保守区域的多靶点siRNA,体内、外评价同时沉默DNMT3对肾细胞癌增殖、侵袭能力的影响。方法:基于DNMT3A/3B的同源保守区域,设计制作针对二者同源区域的2对siRNA序列(si DNMT3A/B-1及si DNMT3A/B-2),以Western印迹法验证沉默效率。转染肾细胞癌786-0细胞系后,分别以体外、体内实验验证其对于肾细胞癌增殖、侵袭能力的影响。结果:针对DNMT3A/B同源保守区siRNA序列,能够显著降低DNMT3A及3B的蛋白表达,并可以显著降低786-0细胞划痕迁移、增殖、侵袭能力,其侵袭、增殖关键基因(Ki-67、Vimentin、VEGF、CD31、MMP2)表达显著下调。体内研究证实,敲除组小鼠皮下瘤生长速度显著降低伴总体生存率显著延长(P<0.05),且皮下瘤内侵袭、增殖关键基因表达显著下调(P<0.05)。结论:基于DNMT3同源保守区域可获得多靶点有效siRNA;靶向下调肾细胞癌786-0细胞系DNMT3A及3B表达能够显著降低细胞增殖、侵袭能力;靶向DNMT3是肾细胞癌治疗的潜在靶点。

主 题 词：DNA甲基化 肾细胞癌 DNA甲基化转移酶3 多靶点siRNA 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1672-4992.2016.24.005

馆 藏 号：203208689...