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PEDV-TGEV-RV三重PCR检测方法的建立

PEDV-TGEV-RV三重PCR检测方法的建立

作     者:邹云婧 梁中银 林密 袁万哲 孙继国 ZOU Yun-jing LIANG Zhong-yin LIN Mi YUAN Wan-zhe SUN Ji-guo

作者机构:河北农业大学动物医学院河北保定071001 河北农业大学动物科技学院河北保定071001 中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃兰州730046 河北省兽医生物技术工程技术研究中心河北保定071001 农业部动物疫病病原生物学华北区观测实验站河北保定071001 

基  金:河北省科技计划项目(16226604D) 

出 版 物:《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期:2016年第46卷第11期

页      码:1383-1387页

摘      要:根据G en Bank中已登陆的猪流行性腹泻病毒(PED V)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(RV)的参考基因序列,设计3对引物分别用于扩增PEDV的N基因、TGEV的M基因、RV的VP7基因的目的片段;通过优化反应体系,建立了同时检测PEDV、TGEV、RV的三重PCR检测方法。敏感性和特异性试验的结果表明,该方法对这3种病毒的最低核酸检出量分别为39.5 pg(PEDV)、38.1 pg(TGEV)和51.6 pg(RV)。该方法可同时扩增477 bp(PEDV)、263 bp(TGEV)、355 bp(RV)的特异性基因片段,而对猪瘟病毒(CSF V)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和伪狂犬病病毒(PRV)等病毒的检测结果均为阴性。三重PCR与单一PCR的符合率为100%。上述结果表明,该方法的建立对于这3种病毒的临床快速检测与流行病学调查具有十分重要的意义。

主 题 词:猪流行性腹泻病毒 猪传染性胃肠炎病毒 猪轮状病毒 三重PCR 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录:

D O I:10.16656/j.issn.1673-4696.2016.11.007

馆 藏 号:203208740...

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