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淡色库蚊抗药性相关基因——NYD-MLC2基因的克隆与分析

淡色库蚊抗药性相关基因——NYD-MLC2基因的克隆与分析

作     者:钱瑾 孙静 孙立新 孙艳 胡小邦 马磊 朱昌亮 QIAN Jin;SUN Jing;SUN Li-xin;SUN Yan;HU Xiao-bang;MA Lei;ZHU Chang-liang

作者机构:南京医科大学病原生物学系江苏南京210029 

基  金:国家自然科学基金资助项目(NO30371255) 江苏省高校自然科学研究项目(03KJB180082) 

出 版 物:《南京医科大学学报(自然科学版)》 (Journal of Nanjing Medical University(Natural Sciences))

年 卷 期:2006年第26卷第7期

页      码:473-476页

摘      要:目的:获取淡色库蚊抗药性相关基因NYD-MLC2的cDNA全长序列并鉴定其在抗性品系和敏感品系中的表达差异。方法:根据抑制性差减杂交(SSH)结合cDNA芯片分离获得的淡色库蚊抗药性相关NYD-MLC2基因片段序列设计引物,采用快速扩增cDNA末端法(rapidamplificationofcDNAends,RACE)扩增NYD-MLC2基因3′、5′端,经对位拼接获得全长序列,并进行生物信息学分析;荧光定量PCR验证此基因在抗性和敏感品系的表达差异。结果:获得淡色库蚊NYD-MLC2cDNA全长序列,开放阅读框为630bp(GenBank/NCBIDQ140391),编码210个氨基酸。蛋白质序列分析显示,NYD-MLC2与冈比亚按蚊(Anophelesgambiae)一个未知功能的蛋白同源性最高,为91%;实时荧光定量PCR结果显示,NYD-MLC2在淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系中的表达量是敏感品系的4.08倍。结论:获得淡色库蚊抗药性相关NYD-MLC2基因cDNA全长序列,并证实其在淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系中高表达,提示NYD-MLC2与淡色库蚊溴氰菊酯抗药性相关,值得进一步研究。

主 题 词:淡色库蚊 抗药性 NYD-MLC2基因 RACE 定量PCR 

学科分类:1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D O I:10.3969/j.issn.1007-4368.2006.07.001

馆 藏 号:203208938...

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