虎源流感病毒RT-PCR检测方法的建立及其应用研究

作     者：贺文琦 高玉伟 夏咸柱 杨松涛 王立刚 刘丹 He Wenqi;Gao Yuwei;Xia Xianzhu;Yang Songtao;Wang Ligang;Liu Dan

作者机构：军事医学科学院军事兽医研究所 吉林大学畜牧兽医学院吉林长春130062 黑龙江省东北虎林园 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30471Z95) 全军医学科研基金资助项目(04Z016) 国家科技部科技攻关计划课题(2004BA519A11) 

出 版 物：《中国农学通报》 (Chinese Agricultural Science Bulletin)

年 卷 期：2006年第22卷第11期

页      码：16-21页

摘      要：为临床上能快速诊断虎流感,通过对已分离获得的虎源H5N1流感病毒和GenBank中报道的A型H5N1亚型流感病毒的NP、HA、NA序列,设计合成各个基因的特异性PCR扩增引物和A型流感病毒通用反转录引物。通过优化反应体系及条件,建立一步法可同时扩增出3个基因的联合RT-PCR检测方法。将该方法用于临床病料检测,并与电镜负染、HA/HI及病毒分离等方法进行比较。结果,NP、HA、NA基因的扩增片段大小分别为464bp、581bp、173bp,其检测的敏感性约100个TCID50。该方法的检出率和病毒分离结果相符,高于电镜负染和HA/HI试验。结果显示,该方法可用于虎源流感病毒的临床或实验室检测。

主 题 词：虎源流感病毒 H5N1 RT-PCR 检测方法 

学科分类：090603[090603] 0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-水产类] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-6850.2006.11.003

馆 藏 号：203209049...