腺病毒介导MCP-1-siRNA对人单核细胞体外迁移能力的影响

作     者：谭力 缪洪明 甘立霞 卢忠燕 陈姗 TAN Li;MIAO Hongming;GAN Lixia;LU Zhongyan;CHEN Shan

作者机构：第三军医大学学员旅七队重庆市400038 第三军医大学生物化学与分子生物学教研室重庆市400038 

基　　金：国家自然科学基金(No.30670998) 全军医学科研"十一五"计划国际合作项目(No.06H025) 第三军医大学学员创新基金~~ 

出 版 物：《医学分子生物学杂志》 (Journal of Medical Molecular Biology)

年 卷 期：2008年第5卷第6期

页      码：493-497页

摘      要：目的构建针对单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein 1,MCP-1)基因的小分子干扰RNA(siRNA)重组腺病毒,探讨干扰MCP-1表达对人单核细胞白血病株THP-1迁移能力的影响。方法设计并合成针对人MCP-1的siRNA的靶DNA序列,克隆于穿梭载体pAdTrack-CMV中,与带有腺病毒骨架质粒pAdeasy-1的BJ5183细菌中进行同源重组,获得重组腺病毒载体pAdeasy-si-MCP-1,转染人胚肾细胞株293细胞,包装并扩增病毒颗粒。体外感染能表达MCP-1的293细胞,RT-PCR检测siRNA对MCP-1转录水平影响。Millicell细胞迁移实验检测对人单核细胞白血病株THP-1体外迁移能力的影响。结果高糖诱导下,人293细胞MCP-1的表达增强;而Ad-si-MCP-1感染后,能够显著抑制高糖刺激的MCP-1 mR-NA水平的升高;Ad-si-MCP-1感染293细胞后的培养上清对THP-1的趋化作用较高糖刺激组及其siRNA阴性对照组显著降低。结论成功构建了抑制MCP-1表达的siRNA腺病毒载体,其抑制MCP-1表达可明显抑制高糖诱导的THP-1的趋化作用,提示MCP-1表达的干预可能为糖尿病肾病等MCP-1相关疾病提供新的预防和治疗手段。

主 题 词：单核细胞趋化蛋白1 糖尿病肾病 腺病毒介导 体外迁移能力 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3870/j.issn.1672-8009.2008.06.006

馆 藏 号：203209662...