慢病毒介导的环氧合酶-2核糖核酸干扰对类风湿性关节炎患者滑膜细胞的影响

作     者：张海宁 李晓飞 张钊 杜清峰 冷萍 王英振 Zhang Haining Li Xiaofei Zhang Zhao Du Qingfeng Leng Ping Wang Yingzhen

作者机构：青岛大学附属医院关节外科266000 山东省平原县第一人民医院脊柱关节外科253100 

基　　金：国家自然科学基金(81272056) 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2016年第33卷第11期

页      码：2477-2480页

摘      要：目的 体外筛选设计并合成的抑制效率最佳的短发夹核糖核酸（shRNA）序列,并观察慢病毒介导的环氧合酶-2（COX-2） shRNA对类风湿性关节炎（RA）患者滑膜细胞的影响.方法 首先根据人COX-2 mRNA序列自行设计4对不同的COX-2shRNA序列,然后包装合成分别含有各对序列的慢病毒载体,并将各组慢病毒载体分别转染RA患者滑膜细胞,通过实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）、酶联免疫吸附试验法（ELISA）分别检测转染后细胞基因水平及蛋白质水平的变化,从而筛选最佳抑制序列.结果 以慢病毒为载体介导的COX-2 shRNA基因转染滑膜细胞后,未观察到对细胞生长速度及细胞形态有明显负面影响,转染后COX-2 mRNA表达水平显著下降,从0.83±0.09、0.84±0.06降到0.15 ±0.01、0.15 ±0.01 （P＜0.05）,相应组别的前列腺素E2（PGE2）[从（160.96±0.23） ng/L降到（84.44±1.02） ng/L]、血管内皮生长因子（VEGF）[从（93.10±0.84） ng/L降到（57.35±1.04） ng/L]、白细胞介素（IL）-1β[从（19.69 ±0.57） ng/L降到（10.60±0.53） ng/L]、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）[从（31.52 ±0.33） ng/L降到（14.55 ±0.59） ng/L]表达量显著降低（P＜0.05）.结论 慢病毒介导的RNA干扰可以显著抑制RA患者滑膜细胞COX-2的表达,从而降低炎性因子的表达量.

主 题 词：滑膜细胞 RNA干扰 环氧合酶-2 细胞因子 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 10[医学] 

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2016.11.012

馆 藏 号：203209959...