利用RNAi逆转录病毒载体系统对人朊病毒蛋白表达的稳定抑制

作     者：徐文婧 王娣 王娟 杨怀义 Wenjing Xu;Di Wang;Juan Wang;Huaiyi Yang

作者机构：中国科学院微生物研究所北京100101 中国科学院研究生院北京100039 北京中医药大学北京100029 

基　　金：国家自然科学基金(No.30770086)资助 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2009年第25卷第7期

页      码：1022-1027页

摘      要：朊病毒是引起可传染的致死性海绵状脑病的致病因子,细胞中正常的朊病毒蛋白(PrPC)在该疾病病程发展中起着必不可少的作用。同时,PrPC已被证明在胃癌、乳腺癌等癌症中发挥着保护癌细胞的作用。根据人源PrPC(HuPrPC)cDNA序列,本研究设计了4种19nt的siRNA,将其构建成RNAi逆转录病毒载体系统,进行了其对HuPrPC表达的抑制效应的分析,从中获得了能高效稳定抑制HuPrPC表达的3种靶向序列,其中si626(5′-GGTTGAGCAGATGTGTATC-3′)的抑制效果最为明显,其抑制效率可达85%以上。随后,利用筛选出的si292和si626的稳定干扰细胞系进行了细胞浸润性实验,结果发现,PrPC干扰细胞系细胞浸润能力显著下降。这为进一步研究朊病毒疾病的基因治疗、以PrPC为靶标进行PrPC相关癌症的辅助治疗研究奠定了一定的基础。

主 题 词：朊病毒 RNAi 逆转录病毒载体 细胞浸润 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100204[100204] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1000-3061.2009.07.010

馆 藏 号：203210055...