猪弓形虫和附红细胞体双重PCR检测方法的建立及应用

作     者：于新友 李天芝 张颖 李峰 沈志强 YU Xinyou;LI Tianzhi;ZHANG Ying;LI Feng;SHEN Zhiqiang

作者机构：山东绿都生物科技有限公司山东滨州256600 山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600 

基　　金：山东省现代农业产业技术体系生猪产业创新团队项目(SDAIT-08-17) 

出 版 物：《养猪》 (Swine Production)

年 卷 期：2016年第6期

页      码：121-124页

摘      要：根椐Gen Bank中登录的猪弓形虫和附红细胞体核苷酸序列,分别设计2对引物,在建立各病原单项PCR技术的基础上,优化双重PCR反应条件,建立了2种病原的双重PCR检测方法,用这2对引物对同一样品中的弓形虫和附红细胞体核酸模板进行双重PCR扩增,结果可同时扩增弓形虫的241 bp,附红细胞体的748 bp的特异性片段,而对其它5份猪病原及对照的PCR扩增结果均为阴性。敏感性测定结果表明,该双重PCR技术能检出0.1 pg的弓形虫和0.1 pg的附红细胞体模板。用72份临床病料对此研究双重PCR技术和单项PCR技术进行对比验证,结果显示,两者总符合率为100%。表明建立的双重PCR检测方法具有特异、快速、准确的特点,可用于对这两种病原的同时检测和鉴别诊断。

主 题 词：猪弓形虫 附红细胞体 双重PCR 检测 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.13257/j.cnki.21-1104/s.2016.06.042

馆 藏 号：203210118...