猪伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gB主要抗原表位区基因的克隆及原核表达

作     者：罗飞 陈义平 陆明哲 彭大新 周洁 李宇琴 徐宝娟 南文龙 LUO Fei;CHEN Yi-Ping;LU Ming-Zhe;PENG Da-Xin;ZHOU Jie;LI Yu-Qin;XU Bao-Juan;NAN Wen-Long

作者机构：中国动物卫生与流行病学中心诊断液研究室山东青岛226032 扬州大学兽医学院江苏扬州225009 

基　　金："十一五"国家科技支撑项目(2006BAD6A13) 

出 版 物：《中国动物检疫》 (China Animal Health Inspection)

年 卷 期：2009年第26卷第12期

页      码：27-28,36页

摘      要：参照GenBank发表的猪伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gB主要抗原表位的编码区基因序列,设计一对引物,通过PCR扩增后,将约为600bp的目的片段克隆到pGEM-T载体上,酶切后插入原核表达载体pET-32(a)的T7启动子下游,构建的重组质粒pET-gB经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达。SDS-PAGE结果显示,表达产物分子量约为42.4KDa,主要以包涵体形式存在。BandScan分析表明,表达量约占菌体蛋白的60.5%。利用His亲和层析方法得到了纯化的表达产物。Western blotting结果显示,重组蛋白能与阳性血清发生特异性反应,具有较好的抗原反应原性,可以作为检测用抗原。

主 题 词：猪伪狂犬病毒 囊膜糖蛋白gB 主要抗原表位 原核表达 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-944X.2009.12.013

馆 藏 号：203210191...