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RNA干扰技术沉默GP73对人肝癌HepG2细胞迁移和侵袭的影响

RNA干扰技术沉默GP73对人肝癌HepG2细胞迁移和侵袭的影响

作     者:陈默 赵坤 柳鹏程 王根年 魏丰贤 倪睿 徐小东 张有成 

作者机构:兰州大学第二医院普外科肝胆胰外科研究所兰州730030 

基  金:甘肃省消化系肿瘤重点实验室开放课题(lzujbky-2011-t03-04) 秦惠君与李政道中国大学生见习进修基金(ZJSH20150001)~~ 

出 版 物:《上海交通大学学报(医学版)》 (Journal of Shanghai Jiao tong University:Medical Science)

年 卷 期:2016年第36卷第11期

页      码:1588-1593页

摘      要:目的·探讨RNA干扰技术(RNAi)沉默人肝癌HepG2细胞中高尔基体蛋白73(GP73)基因表达后,对细胞迁移和侵袭能力的影响。方法·应用阳离子脂质体法将设计合成的GP73小干扰RNA(siRNA)瞬时转染HepG2细胞。HepG2细胞分为空白对照组、阴性对照组和GP73 siRNA干扰组。各组培养48 h后,采用实时定量PCR(qRT-PCR)和ELISA法检测转染后HepG2细胞中GP73 mRNA和蛋白表达水平变化,Transwell迁移实验、划痕愈合实验及侵袭实验分别观察迁移和侵袭能力改变,qRTPCR和Western blotting法检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9的表达情况。结果·GP73 siRNA能显著降低HepG2细胞中GP73 mRNA和蛋白的表达,转染后细胞的迁移和侵袭能力明显下降,其MMP-2和MMP-9 mRNA和蛋白表达水平均明显降低。结论·siRNA干扰介导GP73基因沉默可抑制人肝癌HepG2细胞的迁移和侵袭,其机制可能与下调MMP-2和MMP-9的表达水平有关。

主 题 词:高尔基体蛋白73 肝细胞癌 HepG2细胞 RNA干扰 迁移 侵袭 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1674-8115.2016.11.009

馆 藏 号:203210306...

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