液相芯片技术同时检测六种猪繁殖障碍病毒的方法研究

作     者：杨显超 吴秀娟 李凯航 杨德全 鞠厚斌 葛菲菲 王建 Yang Xianchao;Wu Xiujuan;Li Kaihang;Yang Dequan;Ju Houbin;Ge Feifei;Wang Jian

作者机构：上海市动物疫病预防控制中心上海201103 

基　　金：上海市市级农口系统青年人才成长计划(沪农青字〔2014〕第2-11号) 上海市生猪产业技术体系(沪农科产字〔2016〕第6号) 

出 版 物：《中国动物检疫》 (China Animal Health Inspection)

年 卷 期：2016年第33卷第12期

页      码：78-84页

摘      要：在GenBank中收集猪细小病毒（PPV）结构蛋白VP2基因、猪圆环病毒2型（PCV2）的ORF2序列、猪伪狂犬病毒（PRV）的gB基因、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的NSP2基因、猪瘟病毒（CSFV）的E2基因和乙型脑炎病毒（JEV）的M基因，利用Primer 5.0等分子生物学软件对收集的序列分析比较，筛选出上述基因的特异保守序列并设计引物和探针，将设计好的探针与相应的微球偶联，优化条件，建立检测方法。结果表明：建立的检测PPV、PCV2、PRV、PRRSV、CSFV、JEV 6种病毒核酸的多重液相芯片技术具有较好的特异性、敏感性和稳定性，对PPV、PCV2、PRV、PRRSV、CSFV、JEV 6种病毒核酸的最低检出量分别为8.50×102 copies/μL、2.87×102 copies/μL、2.07×102 copies/μL、2.61×102 copies/μL、2.34×102 copies/μL、2.05×102 copies/μL，与相应病毒PCR/RT-PCR检测方法相比，敏感性提高了100-1000倍；对临床388份样品同步进行荧光PCR与液相芯片检测，结果99.87%相符。本方法为液相芯片技术在动物多病毒快速高通量检测、鉴别诊断等应用方面奠定了基础。

主 题 词：液相芯片技术 猪繁殖障碍病毒 检测方法 

学科分类：090602[090602] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-944X.2016.12.022

馆 藏 号：203210323...