猪链球菌2型实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

作     者：李建达 于江 张玉玉 任素芳 陈蕾 郭立辉 孙文博 陈智 王淞 刘俊珍 杜以军 李俊 杨灵芝 王金宝 吴家强 LI Jian-da;YU Jiang;ZHANG Yu-yu;REN Su-fang;CHEN Lei;GUO Li-hui;SUN Wen-bo;CHEN Zhi;WANG Song;LIU Jun-zhen;DU Yi-jun;LI Jun;YANG Ling-zhi;WANG Jin-bao;WU Jia-qiang

作者机构：青岛农业大学动物科技学院青岛266109 山东省农业科学院畜牧兽医研究所济南250100 山东滨州沃华生物工程有限公司滨州256600 

基　　金：泰山学者特聘专家工程经费 山东省现代农业产业技术体系(SDAIT) 山东省农业科学院重大科技成果培育计划(2014CGPY04) 山东省农业科学院青年科研基金(2015YQN51) 山东省农业科学院农业科技创新工程项目(CXGC2016B14) 山东省农业重大应用技术创新项目 山东省自然科学基金(ZR2015YL078) 

出 版 物：《中国畜牧兽医》 (China Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2016年第43卷第12期

页      码：3107-3113页

摘      要：试验根据猪链球菌2型荚膜多糖（CPS）抗原设计 CPS2J 基因特异性引物,建立猪链球菌2型实时荧光定量 PCR 检测方法。结果显示,该方法的标准曲线为 y=-3.073x＋36.87,r=0.995,熔解曲线只有单一的特异峰。敏感性试验显示,该方法可以检测出模板最低浓度为1.0×10^1拷贝/μL,是普通 PCR 的10倍；特异性试验显示,对猪链球菌2型具有良好的特异性,能够区分其他血清型猪链球菌和其他细菌；重复性试验变异系数为0.37%-0.63%,均低于2.5%。临床检测显示该方法的敏感性明显高于常规 PCR 方法和细菌分离的方法。以上结果表明,本研究建立的方法敏感性高、特异性强、重复性好,有利于对猪链球菌2型的快速检测。

主 题 词：猪链球菌2型 实时荧光定量PCR 敏感性 特异性 重复性 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16431/j.cnki.1671-7236.2016.12.004

馆 藏 号：203210430...