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还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶-1基因重组真核表达质粒的构建及其对血管平滑肌细胞凋亡的影响

还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶-1基因重组真核表达质粒的构建及其对血管平滑肌细胞凋亡的影响

作     者:胡小平 王志维 邓宏平 吴红兵 任宗力 胡锐 HU Xiao-ping;WANG Zhi-wei;DENG Hong-ping;WU Hong-bing;REN Zong-li;HU Rui

作者机构:武汉大学人民医院心血管外科湖北武汉430060 

基  金:国家自然科学基金面上项目(编号:81570428) 中央高校基本科研业务费专项资金项目(编号:2042014kf0117) 湖北省自然科学基金面上项目(编号:2015CFB169) 

出 版 物:《新乡医学院学报》 (Journal of Xinxiang Medical University)

年 卷 期:2016年第33卷第11期

页      码:937-940页

摘      要:目的构建含人还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶-1(NOX1)基因重组真核表达质粒,探讨其对血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡的影响。方法通过美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库查找NOX1基因的mRNA序列,针对蛋白质编码区(CDS)设计引物,以人c DNA为模板扩增出NOX1基因全长CDS序列,经双酶切鉴定后,将NOX1基因与真核表达载体pc DNA3.1(+)连接,再经双酶切、测序鉴定。运用脂质体转染重组体pc DNA3.1(+)-NOX1至VSMC中,观察NOX1表达及VSMC凋亡情况。结果重组体中NOX1基因片段和载体DNA大小与预期一致。经BLAST(the basic local alignment search tool)比对,与NCBI数据库中的NOX1基因序列具有高度的同源性。pc DNA3.1(+)-NOX1能促进VSMC中NOX1蛋白高表达,并促使VSMC的凋亡。结论 NOX1基因重组真核表达质粒能促使VSMC凋亡,为阐明NOX1在主动脉夹层中的作用及分子机制研究奠定了基础。

主 题 词:主动脉夹层 氧化应激 还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶-1 质粒 血管平滑肌细胞 细胞凋亡 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 09[农学] 100201[100201] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 10[医学] 

D O I:10.7683/xxyxyxb.2016.11.001

馆 藏 号:203210508...

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