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应用母体外周血中游离DNA鉴定细毛羊胎儿性别研究

应用母体外周血中游离DNA鉴定细毛羊胎儿性别研究

作     者:赵冰茹 黄锡霞 田可川 石秋香 田月珍 石晓雷 

作者机构:新疆农业大学动物科学学院新疆乌鲁木齐830052 新疆绒毛用羊遗传育种与繁殖实验室新疆乌鲁木齐830011 新疆畜牧科学院新疆乌鲁木齐830011 

基  金:国家自然科学基金(31360543 31460593) 农业部体系项目(CARS-40) 新疆农业大学产学研联合培养研究生示范基地项目(xjaucxy-yjs-20152012) 

出 版 物:《中国畜牧杂志》 (Chinese Journal of Animal Science)

年 卷 期:2016年第52卷第23期

页      码:10-14页

摘      要:本研究针对不同妊娠时期细毛羊进行胎儿性别鉴定工作。首先对外周血浆/血清分别采用加热法和酚-氯仿法提取游离DNA。通过普通PCR扩增雄性性别决定基因(sex determining region Y,SRY)和β-actin检测基因的目的片段。鉴于部分样品未扩增出SRY基因目的片段,设计2对内外引物,运用优化后的巢式PCR体系再次针对SRY目的基因展开特异性扩增。最后对每个妊娠时间段的鉴定结果和实际生产结果进行统计,计算准确率。结果表明:加热法和酚-氯仿法均成功分离提取出妊娠母羊外周血浆/血清中的游离DNA,并扩增出β-actin检测基因片段;SRY阳性样本扩增出了SRY目的基因片段和β-actin检测基因片段,SRY阴性样本只扩增出了β-actin检测基因片段;性别鉴定的平均准确率达到81.25%(19.5/24),SRY基因检出率与妊娠时间的长短呈正比。结论,本研究建立了一种基于外周血游离DNA检测细毛羊胎儿性别的非创伤性且高效低廉的产前诊断技术,但性别鉴定的准确率还有待提高。

主 题 词:细毛羊 外周血游离DNA SRY 性别鉴定 

学科分类:0905[农学-林学类] 09[农学] 090501[090501] 

馆 藏 号:203210544...

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