人Toll样受体4重组质粒的构建与鉴定

作     者：钱钧 郭彩玲 崔洪波 宋武琦 李爱梅 Qian Jun;Guo Cailing;Cui Hongbo;Song Wuqi;Li Aimei

作者机构：哈尔滨医科大学微生物学教研室、黑龙江省感染与免疫重点实验室、黑龙江省高校医学病原学重点实验室、伍连德研究所150081 

基　　金：黑龙江省教育厅科学技术研究项目(12521289) 

出 版 物：《国际免疫学杂志》 (International Journal of Immunology)

年 卷 期：2016年第39卷第6期

页      码：543-546页

摘      要：目的 构建人Toll样受体4（TLa-4）3＇非编码区（UTR）野生型/突变型基因重组表达质粒.方法 在293T细胞中提取基因组DNA为模板,扩增并获得TLR4基因的3＇UTR片段.根据TLR43＇UTR与miR-122的靶点预测,设计TLR4 3＇UTR突变型TLR4 3＇UTR-m1.将pmiR-RB-REPORT^TM质粒和TLR4 3＇UTR/TLR4 3＇UTR-m1 PCR产物双酶切,将酶切后的载体与PCR产物连接,转化入DHSα细胞,在含Amp抗生素的LB固体培养基上培养,筛选阳性菌株,进行PCR验证及序列测定.结果 成功构建人TLR4 3＇UTR野生型/突变型重组质粒.结论 构建的质粒可以用于TLR4与miR-122相互作用的研究,为研究miRNA的作用提供依据.

主 题 词：Toll样受体4 基因重组 质粒 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1673-4394.2016.06.004

馆 藏 号：203210858...