环介导等温扩增法检测棘颚口线虫方法的建立

作     者：张森 邓艳 黄燕琼 何淑华 戴金 陈增荣 石磊 柏建山 

作者机构：华南理工大学食品科学与工程学院广东广州510640 广州机场出入境检验检疫局国家水产品检测重点实验室广东广州510470 暨南大学食品安全与营养研究院广东广州510632 

基　　金：国家质量监督检验检疫总局科技计划项目(2015IK055) 广东出入境检验检疫局科技项目(2014GDK25) 

出 版 物：《现代食品科技》 (Modern Food Science and Technology)

年 卷 期：2016年第32卷第12期

页      码：308-313,297页

摘      要：棘颚口线虫是引起人体颚口线虫病最主要的病原,其引起的病例呈世界性分布。由于其复杂的生活史,以及不同生长阶段形态的变化差异,传统的形态学鉴定方法很难鉴别。为了快速、灵敏和可靠的鉴定棘颚口线虫,本研究建立了一套检测棘颚口线虫的DNA环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法。根据LAMP方法原理,针对棘颚口线虫的ITS2 rDNA设计了三套特异性引物特异性识别靶基因。进行了特异性、灵敏度、稳定性和实际样品的测试。结果表明,该方法对棘颚口线虫DNA能够特异性扩增,而比对虫体DNA均无扩增;对含有棘颚口线虫ITS2目的基因片段的质粒DNA的检测限为1 fg/μL,比传统的PCR方法灵敏度高100倍;对51批次实际样品的进行检测,LAMP方法与传统的PCR测序方法结果相符。本研究设计的LAMP检测方法适用于特异性检测棘颚口线虫。

主 题 词：环介导等温扩增技术(LAMP) 棘颚口线虫 快速检测 

学科分类：0832[0832] 1004[医学-公共卫生预防医学类] 1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 10[医学] 

D　O　I：10.13982/j.mfst.1673-9078.2016.12.047

馆 藏 号：203210912...