新疆出血热病毒的实时荧光RT-PCR检测方法研究

作     者：苏锦坤 师永霞 郑夔 李小波 黄吉城 相大鹏 幸芦琴 郭波旋 

作者机构：广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心广州510700 

基　　金：国家质检总局科技计划项目(2008IK256和2011IK128) 国家质检公益项目(2007GYJ023) 

出 版 物：《中国卫生检验杂志》 (Chinese Journal of Health Laboratory Technology)

年 卷 期：2012年第22卷第5期

页      码：962-965页

摘      要：目的:建立新疆出血热病毒的实时荧光RT-PCR检测方法。方法:分析新疆出血热病毒核酸S片段序列的保守性,设计新疆出血热病毒实时荧光RT-PCR引物和探针。以体外转录后的RNA作为阳性对照模板,摸索出实时荧光RT-PCR检测的最佳引物浓度、探针浓度和反应体系条件,并进行灵敏度和特异性分析。结果:建立的新疆出血热病毒的实时荧光RT-PCR检测方法最佳反应体系为:正向引物CCHFV-FP终浓度250 nM,反向引物CCHFV-RP终浓度500 nM,探针CCHFV-Probe终浓度500 nM;扩增程序为:50℃10 min,95℃10 min;95℃5 s,57℃20 s 45次循环。该方法最低检测限约为2 copies病毒/反应,与森林脑炎病毒和汉坦病毒无交叉反应。结论:该方法灵敏度高、特异性强,适用于新疆出血热病毒的快速检测。

主 题 词：新疆出血热病毒 实时荧光RT-PCR 检测 

学科分类：1004[医学-公共卫生预防医学类] 100401[100401] 10[医学] 

馆 藏 号：203211369...