改进的PCR法克隆带小棒链霉菌cefD基因

作     者：张虹 蒋亚琴 张惠展 

作者机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海200237 

出 版 物：《华东理工大学学报（自然科学版）》 (Journal of East China University of Science and Technology)

年 卷 期：2002年第28卷第3期

页      码：252-255页

摘      要：以 GC含量高达 74%的带小棒链霉菌 ( ***)染色体 DNA为模板 ,从引物设计、退火温度、有机辅剂及 DNA聚合酶等方面改善 PCR反应体系和扩增条件 ,成功地克隆得到了异青霉素异构酶的 cef D基因。改进后的 PCR体系中 φDMSO=0 .0 5并加入适量的 Taq DNA聚合酶 ,退火温度比常规选择高一些 ,从而克服了常规 PCR法扩增链霉菌基因遇到的二级结构复杂、引物与模板难以配对及引物间和引物内部易形成碱基配对等问题。改进后的 PCR法提高了链霉菌基因克隆的效率 ,也可以广泛应用于高

主 题 词：PCR法 克隆 带小棒链霉菌 cefD 基因 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1006-3080.2002.03.009

馆 藏 号：203212409...