埃博拉病毒莱斯顿亚型实时荧光定量PCR检测方法的建立

作     者：许黎黎 鲍琳琳 谷松至 秦川 XU Lili;BAO Linlin;GU Songzhi;QIN Chuan

作者机构：中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021 

基　　金：科技重大专项--艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治:2012ZX10004501-004 国家自然科学基金31370203 北京市自然科学基金7142106 中国医学科学院中央级公益性科研院所基本科研业务费 

出 版 物：《病毒学报》 (Chinese Journal of Virology)

年 卷 期：2015年第31卷第3期

页      码：276-281页

摘      要：本研究的目的为建立一种灵敏、快速、定量检测埃博拉病毒莱斯顿亚型核酸的实时荧光定量PCR检测方法及试剂盒。首先选择埃博拉病毒莱斯顿亚型的保守基因NP基因作为检测靶目标,筛选出保守序列并设计合成一对特异性引物。然后将连有NP全长基因的重组质粒作为定量标准品,将10倍系列稀释的重组质粒进行荧光定量PCR扩增,绘制标准曲线,并进行重复性、灵敏度及特异性检测。结果显示建立的埃博拉病毒莱斯顿亚型荧光定量PCR检测方法,其灵敏度可达102拷贝/μL,不同梯度标准品间线性关系(R2)达0.997,斜率为-0.3101,扩增效率为110.145%,所有标准品均在79.94℃出现尖且窄的特异性熔解峰。利用该检测系统可以快速定量检测埃博拉病毒莱斯顿亚型核酸,灵敏度高、重复性好,可用于基础及临床实验室对埃博拉病毒莱斯顿亚型感染的快速诊断和临床效果的监测,具有实际的应用价值。

主 题 词：埃博拉病毒莱斯顿亚型 荧光定量PCR 病毒载量 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13242/j.cnki.bingduxuebao.002696

馆 藏 号：203212803...