运用氨基酸分析法和DOE法优化抗PD-1单克隆抗体生产用培养基

作     者：高玲梅 张慧娟 李若竹 于玉根 GAO Lingmei ZHANG Huijuan LI Ruozhu YU Yugen

作者机构：深圳万乐药业有限公司深圳518029 

基　　金：2014年度深圳市科技创新委员会技术创新计划战略新兴产业发展专项资金资助项目 项目编号:JSGG20141117163744687 

出 版 物：《工业微生物》 (Industrial Microbiology)

年 卷 期：2017年第47卷第1期

页      码：43-51页

摘      要：本研究采用氨基酸分析法结合DOE设计法优化并获得高表达抗PD-1单克隆抗体生产用基础和补料培养基。通过对市售多种基础和补料培养基进行筛选,获得细胞生长状况较优的基础培养基和抗体表达较高的补料培养基,利用氨基酸分析法检测较优基础培养基和补料培养基中氨基酸消耗情况,确定影响细胞生长和抗体表达的关键氨基酸种类,利用DOE分析软件设计分别在较优基础和补料培养基中添加不同浓度的氨基酸种类及浓度,根据细胞生长及抗体表达,优化得到抗PD-1单克隆抗体的基础和补料培养基组合。最终优化后基础培养基配方为:Hycell CHO培养基中添加1.04 mmol/L L-天冬酰胺和0.76 mmol/L L-谷氨酰胺。最终优化后补料培养基配方为:OPM CHOCD Feed1补料培养基中添加38.7 mmol/L L-组氨酸,75.0 mmol/L L-酪氨酸,64.0 mmol/L L-丝氨酸,49.2 mmol/L L-谷氨酰胺和18.7 mmol/L L-半胱氨酸。经过3 L反应器培养验证,优化后的培养基比未优化时,最大活细胞密度(PVCD)提高了62.7%,抗PD-1单克隆抗体表达量提高了71.5%,且活性无明显差异。

主 题 词：抗PD-1单克隆抗体 培养基优化 DOE分析 氨基酸分析 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1001-6678.2017.01.007

馆 藏 号：203216183...