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雷公藤牻牛儿基焦磷酸合酶基因TwGPPS克隆与表达分析

雷公藤牻牛儿基焦磷酸合酶基因TwGPPS克隆与表达分析

作     者:屠李婵 张逸风 苏平 胡添源 童宇茹 关红雨 赵瑜君 张夏楠 袁媛 高伟 黄璐琦 

作者机构:首都医科大学中医药学院北京100069 中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地北京100700 

基  金:北京高等学校高水平人才交叉培养"实培计划"项目 国家自然科学基金优秀青年科学基金项目(81422053) 

出 版 物:《中国中药杂志》 (China Journal of Chinese Materia Medica)

年 卷 期:2017年第42卷第2期

页      码:220-225页

摘      要:根据雷公藤悬浮细胞转录组数据设计特异引物,采用cDNA末端快速扩增技术克隆雷公藤牻牛儿基焦磷酸合酶基因TwGPPS1,TwGPPS2全长cDNA,并进行生物信息学分析和蛋白表达研究。首次克隆得到TwGPPS1核苷酸的完整开放阅读框长度为1 278 bp,编码425个氨基酸蛋白,预测蛋白等电点为6.68,相对分子质量为47.189 kDa;TwGPPS2核苷酸的完整开放阅读框长度为1 269 bp,编码422个氨基酸蛋白,预测蛋白等电点为6.71,相对分子质量为46.774 kDa;进一步构建了原核重组表达载体pET-32a-TwGPPS1,pET-32a-TwGPPS2,并成功诱导出TwGPPS1,TwGPPS2重组蛋白,为深入研究此关键酶基因功能和雷公藤萜类生物合成途径奠定基础。

主 题 词:雷公藤 牻牛儿基焦磷酸合酶 克隆 生物信息学分析 蛋白表达 

学科分类:1008[医学-中药学类] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.19540/j.cnki.cjcmm.20161222.042

馆 藏 号:203217502...

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