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巴马香猪Hsp70基因的克隆、生物信息学分析及其在猪肠上皮细胞IPEC-J2中的表达

巴马香猪Hsp70基因的克隆、生物信息学分析及其在猪肠上皮细胞IPEC-J2中的表达

作     者:韦美兰 徐汉进 雍艳红 贾汝敏 赵云涛 巨向红 WEI Mei-lan;XU Han-jin;YONG Yan-hong;JIA Ru-min;ZHAO Yun-tao;JU Xiang-hong

作者机构:广东海洋大学农学院广东湛江524088 广东海洋大学食品科技学院广东湛江524088 

基  金:国家自然科学基金(31101862 31472243) 

出 版 物:《广东海洋大学学报》 (Journal of Guangdong Ocean University)

年 卷 期:2017年第37卷第1期

页      码:95-100页

摘      要:为研究热应激蛋白70(HSP70)在巴马香猪(Sus scrofa domestica)耐热中的作用,利用NCBI公布的猪Hsp70基因序列设计引物,用RT-PCR克隆巴马香猪Hsp70基因。核酸序列分析表明,巴马香猪Hsp70基因开放阅读框(ORF)长1 932 bp,编码643个氨基酸。该蛋白分子质量为71.1 ku,等电点(PI)为5.88,与野猪、人、牛、羊、犬和鸡的同源性分别为99.2%、82.8%、83.2%、83.6%、82.4%和77.7%。该蛋白非叶绿体转运肽和线粒体导肽,亦非信号肽分泌通道,存在多个明显的疏水区,其中397位疏水性最强,达2.211。将该基因的ORF与真核表达载体pc DNA 3.1/V5-HisTOPO连接构建真核表达载体,并转染IPEC-J2细胞,荧光定量PCR及Western blot检测可见其在基因和蛋白水平的高量表达。

主 题 词:巴马香猪 Hsp70基因 克隆 真核表达 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D O I:10.3969/j.issn.1673-9159.2017.01.015

馆 藏 号:203217924...

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