腺病毒分型基因芯片方法的建立和验证

作     者：陈晓飞 刘琪琦 周伟 张五星 王升启 CHEN Xiao-fei LIU Qi-qi ZHOU Wei ZHANG Wu-xing WANG Sheng-qi

作者机构：河北北方学院河北张家口075000 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850 解放军309医院北京100091 

基　　金：国家科技重大专项"重大新药创制"资助项目(2015ZX09J15105-001-001) 

出 版 物：《军事医学》 (Military Medical Sciences)

年 卷 期：2017年第41卷第2期

页      码：130-134页

摘      要：目的建立一种高通量、快速、准确甄别3、7、14、11和55型腺病毒的化学发光基因芯片方法。方法从GenBank中查找这5种腺病毒特异性基因保守区,设计分型的探针并在筛选后进行合成,用于制备寡核苷酸基因芯片。运用多重不对称PCR法扩增特异性基因片段,将扩增产物与基因芯片上的特异性探针杂交,经过洗涤、化学发光显色后,进行结果分析。在优化的多重PCR体系、杂交条件和化学发光检测条件下,对芯片的特异性、灵敏性和重复性进行评价。结果建立的基因芯片方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性,检测质粒参考品最低检测限为3×10~3拷贝/反应,38例临床样本的分型结果与测序法结果基本一致(37/38)。结论建立了一种能快速、灵敏、特异区分5种腺病毒型别的基因芯片分型方法,为腺病毒分型提供一种新的检测手段。

主 题 词：腺病毒科 分型 基因芯片 化学发光 

学科分类：100208[100208] 1004[医学-公共卫生预防医学类] 1002[医学-临床医学类] 100401[100401] 10[医学] 

D　O　I：10.7644/j.issn.1674-9960.2017.02.012

馆 藏 号：203217959...