TIPE3干扰质粒对SW480结肠癌细胞生长的作用及相关机制探讨

作     者：叶宇涵 刘忠臣 齐忠权 庄国洪 殷平 YE Yu-Han LIU Zhong-Chen QI Zhong-Quan ZHUANG Guo-Hong YIN Ping

作者机构：福建医科大学基础医学院福州350004 同济大学第十人民医院普通外科上海200072 厦门大学抗癌研究中心器官移植研究所厦门361004 厦门大学附属中山医院病理科厦门361004 

基　　金：国家自然科学基金(81272720) 福建省属公益类科研院所基本科研专项项目(2016R1102)资助 

出 版 物：《中国免疫学杂志》 (Chinese Journal of Immunology)

年 卷 期：2017年第33卷第3期

页      码：378-383页

摘      要：目的:通过TIPE3干扰质粒转染SW480结肠癌细胞,验证干扰TIPE3表达对SW480结肠癌细胞生长的影响并探讨相关机制。方法:构建TIPE3-shRNA-p SIREN-Retro Q干扰质粒,通过脂质体转染法成功将干扰质粒导入SW480细胞,通过RT-PCR、Western blot检测重组质粒的干扰效率。应用CCK-8方法检测SW480细胞生存率。Annexin V-FITC/PI流式细胞法检测细胞凋亡。使用Western blot检测细胞增殖、凋亡相关分子的表达情况。结果:成功设计、构建和筛选具有生物活性且干扰效率最佳的TIPE3-shRNA-p SIREN-Retro Q干扰质粒。CCK-8检测证实干扰SW480结肠癌细胞TIPE3表达可以抑制细胞生长。流式结果显示,TIPE3-shRNA3干扰组的凋亡率为(27.99±1.087)%,显著高于正常细胞组(12.10±2.213)%及转染空载质粒组(11.44±0.277 0)%。证实了降低TIPE3表达可以增加SW480对a DR5Sc Fv所诱导的细胞凋亡敏感性。Western blot结果显示干扰TIPE3表达可以活化caspase3蛋白,降低p-AKT、p-PDK1、PCNA等分子的表达。结论:干扰TIPE3的表达对SW480结肠癌细胞具有促进凋亡,抑制增殖的作用。

主 题 词：TIPE3shRNA 结肠癌 凋亡 增殖 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-484X.2017.03.013

馆 藏 号：203218043...