西葫芦ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选

作     者：郭秀霞 李灵芝 马太光 雷逢进 张瑞腾 李海平 GUO Xiuxia;LI Lingzhi;MA Taiguang;LEI Fengjin;ZHANG Ruiteng;LI Haiping

作者机构：山西农业大学园艺学院山西太谷030801 山西省农业科学院棉花研究所山西运城044000 

基　　金：国家农业科技成果转化资金项目(2014GB2A300017) 山西省科技攻关项目(201303110084) 山西省回国留学人员科研资助项目(2011050) 山西农业大学引进人才博士科研启动基金项目(2013YJ23) 

出 版 物：《山西农业科学》 (Journal of Shanxi Agricultural Sciences)

年 卷 期：2017年第45卷第3期

页      码：325-327,331页

摘      要：为了确定西葫芦ISSR-PCR的最佳反应体系,以西葫芦基因组DNA为模板,采用正交试验方法,对模板DNA、引物及2×Taq PCR Master Mix的用量进行了优化,并通过梯度PCR确定不同引物的最佳退火温度。结果表明,最佳反应体系为:在20μL的体系中,模板DNA(50 ng/μL)1 L,引物(10μmol/L)3 L,Master Mix 10μL;利用该体系从50条ISSR引物中筛选出18条扩增条带清晰、多态性好的引物。这一体系的建立及引物筛选为以后利用ISSR分子标记技术对西葫芦进行研究提供了科学依据。

主 题 词：西葫芦 ISSR-PCR 正交设计 引物筛选 

学科分类：09[农学] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090202[090202] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1002-2481.2017.03.02

馆 藏 号：203218154...