基于TaqMan MGB探针的黑白轮枝菌检测方法

作     者：郭立新 张祥林 陈先锋 段维军 Guo Lixin;Zhang Xianglin;Chen Xianfeng;Duan Weijun

作者机构：宁波检验检疫科学技术研究院浙江宁波315012 新疆出入境检验检疫局 

基　　金：国家重点研发计划(2016YFF0203201) 浙江省博士后择优资助项目(BSH1402011) 宁波市科研项目(2015C110018&2014C50082) 

出 版 物：《植物检疫》 (Plant Quarantine)

年 卷 期：2017年第31卷第1期

页      码：32-36页

摘      要：根据黑白轮枝菌(Verticillium albo-atrum)及其近似种β-微管蛋白基因(β-tubulin)序列差异,设计并合成1对引物和1条Taq Man-MGB探针,建立了黑白轮枝菌的实时荧光PCR检测方法。对供试黑白轮枝菌及其近似种实验表明,该方法特异性强,只有黑白轮枝菌可被检出。通过对反应体系的优化,确定了最佳反应条件:引物终浓度为1.0μmol/L,探针终浓度为0.7μmol/L。灵敏度试验结果显示,最低检测限量为总DNA含量10 pg(20μL反应体系)。此方法快速灵敏,为快速检测黑白轮枝菌提供了重要参考。

主 题 词：黑白轮枝菌 实时荧光PCR TaqMan-MGB探针 检测 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 

D　O　I：10.19662/j.cnki.issn1005-2755.2017.01.010

馆 藏 号：203218176...