RNA干扰Nodal基因对胃癌细胞凋亡及血管生成的影响

作     者：余洁丽 邱宇安 刘利艳 陈文学 靳文剑 陈火国 钟宁 

作者机构：江西省肿瘤医院330029 

基　　金：江西省青年科学基金资助项目(编号:20132BAB215018) 

出 版 物：《实用癌症杂志》 (The Practical Journal of Cancer)

年 卷 期：2017年第32卷第3期

页      码：401-404页

摘      要：目的构建并鉴定Nodal基因的RNA慢病毒表达载体,探讨Nodal基因对胃癌及血管生成的作用。方法针对Nodal mRNA设计siRNA,构建慢病毒质粒,测序鉴定质粒构建成功。将构建的慢病毒质粒及包装质粒共转染293T细胞,鉴定慢病毒包装成功,并测定其滴度。将慢病毒转染人胃腺癌细胞株MKN-45,通过qPCR检测Nodal基因表达。流式细胞仪检测细胞凋亡。Cellomics仪观察人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管生成。结果通过测序显示,插入Nodal基因RNAi序列正确。包装后测定病毒滴度达(5.0×10~8)TU/ml,qPCR检测提示RNA干扰病毒转染MKN-45细胞株后,Nodal基因表达水平显著下降。干扰后胃癌细胞凋亡率明显上升(P0.05)。结论成功构建了人Nodal基因的RNAi慢病毒表达系统。干扰Nodal基因显著增加胃癌细胞凋亡。

主 题 词：RNA干扰 慢病毒载体 胃肿瘤 血管生成 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1001-5930.2017.03.016

馆 藏 号：203218920...