含A(H1N1)流感病毒NP基因病毒样颗粒的构建和表达

作     者：王云龙 徐桂超 李智涛 孙新城 王国强 昌静峰 李彦霞 WANG Yun-long;XU Gui-chao;LI Zhi-tao;SUN Xin-cheng;WANG Guo-qiang;CHANG Jing-feng;LI Yan-xia

作者机构：河南师范大学生命科学学院河南省新乡市453007 河南省生物工程技术研究中心郑州市450001 郑州大学450001 郑州轻工业学院450002 

基　　金：河南省科技攻关计划(编号:102102313105) 

出 版 物：《实用医学杂志》 (The Journal of Practical Medicine)

年 卷 期：2010年第26卷第17期

页      码：3083-3086页

摘      要：目的:构建并表达含有A(H1N1)流感病毒NP基因片段并可抗RNase降解的病毒样颗粒,作为RT-PCR检测的阳性对照。方法:设计带有NcoⅠ、BamHⅠ酶切位点的引物克隆MS2噬菌体的装配蛋白和包膜蛋白基因,化学合成含BamHⅠ和HindⅢ酶切位点的A(H1N1)流感病毒NP基因片段,将这些基因连接到质粒载体pET-28b(+)上,转化到***21(DE3)感受态细胞中进行表达,表达产物进行纯化,然后进行RNase攻击试验和稳定性试验。结果:获得含NP基因片段的病毒样颗粒,可抵抗RNase降解,并能在37℃稳定保存30d。结论:该病毒颗粒稳定、安全、可靠,可作为A(H1N1)流感病毒RT-PCR检测、定量分析的有效阳性参考品。

主 题 词：流感病毒A型,H1N1亚型 RT-PCR 阳性对照 病毒样颗粒 核糖核酸酶 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1006-5725.2010.17.004

馆 藏 号：203218921...