甲型流感病毒流行毒株检测和分型基因芯片的研制

作     者：李稀罕 王宇 刘方政 顾宏伟 杨永华 Xihan Li;Yu Wang;Fangzheng Liu;Hongwei Gu;Yonghua Yang

作者机构：南京大学病毒学研究所医药生物技术国家重点实验室南京210093 泰州亲和力生物技术有限公司泰州225300 泰州市病毒研究所泰州225300 

基　　金：江苏省科技支撑计划(BG20077035)~~ 

出 版 物：《微生物学报》 (Acta Microbiologica Sinica)

年 卷 期：2010年第50卷第3期

页      码：400-405页

摘      要：【目的】研制一种可同时对甲型流感病毒H1N1、H1N2、H3N2、H5N1和H9N2等5种流行亚型进行检测和分型的基因芯片。【方法】根据National Center for Biotechnology Information中Influenza Virus Resource数据库,针对H1N1、H1N2、H3N2、H5N1和H9N2等5种亚型甲型流感病毒的HA和NA基因设计46条特异性寡核苷酸探针和1条质控探针,点制成基因芯片。利用通用引物扩增流感病毒HA和NA基因,使用Klenow酶对扩增产物进行荧光标记和片段化,将标记后产物和芯片杂交,清洗、扫描后根据荧光信号判定检测结果。用18株不同种属来源的甲型流感病毒分离毒株和186份咽拭子对芯片特异性、敏感性和临床应用进行初步评价。【结果】所有18株分离毒株均能被芯片准确检测并分型,芯片检测灵敏度能达约1×104个病毒基因拷贝。同时8份咽拭子检测结果为H1N1阳性,4份咽拭子为H3N2阳性。【结论】研究表明该芯片具有较高的特异性和灵敏度,可为甲型流感病毒的监测提供一种有效的方法。

主 题 词：甲型流感病毒 基因芯片 检测 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13343/j.cnki.wsxb.2010.03.021

馆 藏 号：203219064...