应用CRISPR/Cas9编辑广东小耳花猪MSTN基因

作     者：王敏 黄翔 石翾 刘小凤 曾检华 刘小红 陈瑶生 何祖勇 WANG Min;HUANG Xiang;SHI Xuan;LIU Xiao-feng;ZENG Jian-hua;LIU Xiao-hong;CHEN Yao-sheng;HE Zu-yong

作者机构：中山大学生命科学学院/有害生物控制与资源利用国家重点实验室广东广州510006 广东壹号食品股份有限公司广东广州510620 

基　　金：国家转基因生物新品种培育重大专项(2016ZX08006003-006) 广东省自然科学基金(2016A0 30313310) 广东省扬帆计划项目(2014YT02H042) 

出 版 物：《广东农业科学》 (Guangdong Agricultural Sciences)

年 卷 期：2017年第44卷第2期

页      码：141-148页

摘      要：MSTN基因是肌肉生长抑制基因,破坏MSTN基因的表达成为提高畜禽肌肉产量的有效途径。通过应用CRISRP/Cas9编辑技术对广东小耳花猪MSTN基因的外显子区域进行编辑,破坏MSTN基因的读码框来抑制其表达,从而提高广东小耳花猪的肌肉产量。共设计了6条靶向MSTN基因3个不同外显子的gRNA,经过T7E1酶切检测和TA克隆分析,发现其中3条gRNA能够发生有效切割,其中切割效率最高的达28.3%,最低为17.0%。gRNA1-1和gRNA3-3突变的广东小耳花猪PEF细胞系,突变效率均在50%以上,其中三号外显子上突变位点的突变率达到61.5%。试验结果为后续进行体细胞核移植,生产MSTN基因编辑的广东小耳花猪奠定了基础。

主 题 词：MSTN CIRSPR/Cas9 广东小耳花猪 基因编辑 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 0905[农学-林学类] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090501[090501] 090102[090102] 

D　O　I：10.16768/j.issn.1004-874X.2017.02.022

馆 藏 号：203220848...