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壳聚糖-磺酸甜菜碱对人肝癌HepG-2细胞的siRNA递送实验研究

壳聚糖-磺酸甜菜碱对人肝癌HepG-2细胞的siRNA递送实验研究

作     者:董伟 李大玉 惠景 范芳 李长福 姜念 刘云 朱欣婷 Dong Wei;Li Dayu;Hui Jing;Fan Fang;Li Changfu;Jiang Nian;Liu Yun;Zhu Xinting

作者机构:遵义医学院贵州省普通高等学校特色药物肿瘤防治重点实验室贵州遵义563099 遵义医学院生物化学教研室贵州遵义563099 

基  金:贵州省科技厅社会发展攻关项目(NO:黔科合SY3008) 遵义医学院招标项目(NO:F-614) 贵州省教育厅特色重点实验室建设项目(NO:黔教合KY字212) 

出 版 物:《遵义医学院学报》 (Journal of Zunyi Medical University)

年 卷 期:2017年第40卷第1期

页      码:42-48页

摘      要:目的设计合成新型高分子材料壳聚糖-磺酸甜菜碱(CS-DMAAPS)化合物,并考察该材料与siRNA复凝后对人肝癌HepG-2细胞的转染能力。方法采取Michael加成法将含C=C双键的磺酸甜菜碱化合物(DMAAPS)与壳聚糖(CS)偶联接枝;利用核磁共振氢谱进行结构表征;CCK-8检测材料的细胞相容性;荧光显微镜观察siRNA的转染效率;Real-time PCR检测转染siRNA后对Bcl-2 mRNA的沉默效率。结果核磁共振氢谱数据表明:DMAAPS已成功枝接到CS上。荧光显微镜观察结果显示:质量比(m0/mt:CS-DMAAPS/siRNA)为32、16、8、4、2的复合颗粒分别转染人肝癌HepG-2细胞24 h后,转染率分别为33.78%、45.82%、50.98%、69.89%、81.22%。Real-time PCR检测结果显示:质量比为4的CS-DMAAPS/siRNA复合颗粒转染人肝癌HepG-2细胞48 h后,对人肝癌HepG-2细胞的Bcl-2基因沉默效率为26.8%。结论壳聚糖-磺酸甜菜碱(CS-DMAAPS)化合物能实现siRNA对人肝癌HepG-2细胞的转染,且细胞相容性良好,能实现目标基因的部分沉默。

主 题 词:壳聚糖 磺酸甜菜碱化合物 复合颗粒 人肝癌HepG-2细胞 siRNA 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D O I:10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2017.0008

馆 藏 号:203221642...

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