SCN3A基因突变型表达载体的构建及在HEK 293细胞中的表达

作     者：陈勇军 邱国真 汤斌 刘稀金 李欣 何妍妍 CHEN Yongjun QIU Guozhen TANG Bin et al

作者机构：南华大学附属南华医院神经内科湖南衡阳421002 深圳市罗湖区人民医院神经内科 广州医科大学神经病学研究所 

基　　金：湖南省教育厅立项课题资助(15C1206) 衡阳市科技局课题资助(2015KJ59) 

出 版 物：《中南医学科学杂志》 (Medical Science Journal of Central South China)

年 卷 期：2017年第45卷第2期

页      码：132-135页

摘      要：目的体外构建含有SCN3A基因mRNA片段的质粒pCMV_6-XL_4-SCN3A的突变体N302S(c.905A>G),为进一步的功能研究奠定实验基础。方法设计带突变位点的引物,以野生型质粒为模板进行定点诱变,构建突变质粒。质粒经扩增纯化后瞬时转染到HEK293细胞中,24 h后用RT-PCR方法验证目的基因的表达。结果重组质粒经酶切鉴定及测序证实突变成功。突变质粒转入HEK293细胞系24 h后,RT-PCR可以检测到目的基因的表达。结论本实验成功地构建了SCN3A基因突变型真核表达载体pCMV_6-XL_4-SCN3A-N302S,并在基因水平上验证了能在HEK293细胞中表达。

主 题 词：SCN3A 质粒 表达 RT-PCR 

学科分类：1001[医学-基础医学] 10[医学] 

D　O　I：10.15972/j.cnki.43-1509/r.2017.02.006

馆 藏 号：203222037...