高分辨率熔解曲线技术检测耐利福平结核杆菌

作     者：李燕 邵燕 陈诚 宋红焕 李国莉 陆伟 竺丽梅 LI Yan;SHAO Yan;CHEN Cheng;SONG Hong-huan;LI Guo-li;LU Wei;ZHU Li-mei

作者机构：江苏省疾病预防控制中心南京210009 

基　　金：国家自然科学基金(81301448) 江苏省青年医学人才项目(QNRC2016541) 

出 版 物：《江苏预防医学》 (Jiangsu Journal of Preventive Medicine)

年 卷 期：2017年第28卷第2期

页      码：121-123页

摘      要：目的建立1种基于荧光定量PCR扩增原理的联合高分辨率熔解曲线技术(qPCR-HRM),用于耐利福平结核杆菌(RR-TB)的快速检测。方法选取GenBank中结核杆菌rpoB基因序列(利福平耐药决定域),分别设计2对特异性引物rpoB-1R/F、rpoB-2R/F扩增rpoB基因的不同片段,构建荧光定量PCR反应体系,加入HRM饱和荧光染料监测扩增产物进行HRM分析。以H_(37)R_a菌株为阴性对照,检测240株临床诊断肺结核培养菌株对利福平(RFP)的耐药性;以传统的药敏实验结果为金标准,对qPCR-HRM法检测RR-TB的灵敏度、特异度、重复性进行评估。结果 qPCR-HRM法检测RR-TB灵敏度为84.8%,特异度为96.5%,批内、批间变异系数均<1%,检测时间为2h以内。结论 qPCR-HRM法检测RR-TB耗时较短、特异度强、灵敏度高、快速易操作,适合在有条件的基层医疗机构进行推广。

主 题 词：耐利福平 结核杆菌 荧光定量PCR-高分辨率熔解曲线技术 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 10[医学] 

D　O　I：10.13668/j.issn.1006-9070.2017.02.01

馆 藏 号：203224116...