一种适用于质谱分析的简化胶内酶解方法

作     者：王旭初 范鹏祥 李银心 

作者机构：中国科学院植物研究所光合作用与环境分子生理学重点实验室北京100093 

基　　金：国家"863"计划项目(No.2007AA091705) 中国科学院重要方向性项目(No.KSCX2-YW-N-013)资助。~~ 

出 版 物：《植物生理与分子生物学学报》 (Journal Of Plant Physiology and Molecular Biology)

年 卷 期：2007年第33卷第5期

页      码：449-455页

摘      要：在常规方法的基础上,设计了一种适于质谱分析的简化胶内酶解方法。改进的步骤包括:(1)通过加大洗涤所用超纯水量、延长涡混时间来强化凝胶洗涤的环节;(2)加入酸化处理来提高胰蛋白酶的活性;(3)在预酶解时不加CaCl_2,减少了酶的自切作用;(4)省略了蛋白质样品脱盐、脱SDS的步骤;(5)直接吸取酶解液进行质谱分析。系统比较该简化酶解法和最新报道的一种酶解方法的质谱鉴定效果,简化法能有效减少酶解后肽段的损失,增加质谱数据库搜索的信息量,得到更可靠的蛋白质鉴定结果。

主 题 词：蛋白质组 胶内酶解方法 双向电泳 肽质量指纹图谱 质谱分析 

学科分类：071010[071010] 0907[农学-草药学] 081704[081704] 07[理学] 08[工学] 0710[理学-生物科学类] 0830[工学-生物工程类] 1001[医学-基础医学] 0817[工学-轻工类] 0829[工学-安全科学与工程类] 0901[农学-植物生产类] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 0713[0713] 

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馆 藏 号：203224748...