实时荧光PCR检测鸡GAPDH基因方法的建立

作     者：李娅 韦平 金元昌 韦信贤 杨先荣 牛搏学 梁韦芬 苏清康 LI Ya;WEI Ping;JIN Yuanchang;WEI Xinxian;YANG Xianrong;NIU Boxue;LIANG Weifen;SU Qingkang

作者机构：广西大学养禽与禽病研究所广西南宁530005 

基　　金：国家自然科学基金项目(30460099 39860055) 广西科技攻关项目(桂科攻0537008-3) 广西自然科学基金项目(桂科自0339003 981101) 广西大学科研重点基金资助项目(2005ZD01) 

出 版 物：《中国家禽》 (China Poultry)

年 卷 期：2008年第30卷第8期

页      码：37-40页

摘      要：根据GenBank上鸡的3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehy-drogenase,GAPDH)基因的序列,在保守区域设计并合成一对引物,采用SYBR GreenⅠ染料建立了荧光定量PCR法。采用梯度浓度的GAPDH基因重组标准品质粒DNA进行荧光定量PCR并建立了标准曲线,经分析显示标准曲线的Ct值与标准品浓度的对数值之间存在良好的线性关系;动力学曲线分析表明,在本研究所建立的反应体系和反应条件下,标准曲线的灵敏度都达到10拷贝/反应。实时荧光定量PCR检测GAPDH基因表达水平标准品质粒和标准曲线的建立,为GAPDH基因作为内参基因进行鸡功能基因与病原基因表达的定量分析奠定了基础。

主 题 词：鸡 GAPDH基因 实时荧光定量PCR 内参基因 

学科分类：071011[071011] 0710[理学-生物科学类] 07[理学] 09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 090402[090402] 

D　O　I：10.16372/j.issn.1004-6364.2008.08.015

馆 藏 号：203224892...