阻断Eag-1通道活性抑制胶质瘤细胞增殖的研究

作     者：黄小舟 胡海燕 郭洪波 HUANG Xiao-zhou;HU Hai-yan;GUO Hong-bo

作者机构：中山大学第三附属医院药剂科广州510630 南方医科大学珠江医院血液科广州510282 南方医科大学珠江医院神经外科南方医科大学广东神经外科研究所广东省脑功能修复与再生重点实验室 

基　　金：国家自然科学基金(30971183) 广东省科技计划项目(2009B030801230) 

出 版 物：《中华神经医学杂志》 (Chinese Journal of Neuromedicine)

年 卷 期：2010年第9卷第10期

页      码：987-990,995页

摘      要：目的 探讨阻断Eag—1通道活性对胶质瘤细胞生物活性的影响。方法设计3对Eag-1通道蛋白的特异性小分子干扰RNA（siRNA）并转染人U87细胞，RT—PCR及Westernblotting检测其对U87细胞Eag-1 mRNA和蛋白表达的影响；将50nmol／LsiRNA1、siRNA2转染U87细胞，同时设5、10、20、30和40mmol／L奎尼丁（Eag-1通道特异性阻断剂）组和空白对照组，MTT法观察作用24、48、72h后U87细胞增殖情况，流式细胞仪检测作用48h后细胞周期、细胞凋亡率、胞内活性氧簇（ROS）浓度的变化。结果RT—PCR及Westernblotting结果显示siRNAl和siRNA2转染U87细胞12h后细胞Eag-1mRNA、蛋白的表达产物带明显弱于空白对照组，而siRNA3转染组产物条带虽也弱于空白对照组，但条带仍清晰；MTT检测结果显示与空白对照组比较，50nm01／LsiRNA1、siRNA2转染组和10、20、30、40mmol／L奎尼丁组细胞培养24、48和72h后吸光度值均降低，差异有统计学意义（P＜0．05），奎尼丁IC。为33．7mmol／L。流式细胞仪分析显示与空白对照组比较，50nmol／LsiRNA1、siRNA2转染组和33．7mmol／L奎尼丁组G1期细胞百分比、细胞凋亡率和胞内ROS水平均增加，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论阻断Eag-1通道活性能明显抑制胶质瘤细胞增殖，使G1期细胞比例、胞内ROS水平明显升高并诱导其凋亡。

主 题 词：神经胶质瘤 Eag-1通道 小分子干扰RNA 奎尼丁 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100210[100210] 10[医学] 

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2010.10.006

馆 藏 号：203225950...