正交设计优化扁蓿豆ISSR反应体系的研究(英文)

作     者：李志勇 李鸿雁 孙启忠 王小丽 师文贵 邢建军 LI Zhi-yong;LI Hong-yan;SUN Qi-zhong;WANG Xiao-li;SHI Wen-gui;XING Jian-jun

作者机构：中国农业科学院草原研究所农业部沙尔沁牧草资源重点野外科学观测试验站内蒙古呼和浩特010010 中国农业科学院郑州果树研究所河南郑州450009 

基　　金：农业部农作物种质资源保护与利用项目(NB09-2130135-8) 牧草种质资源保护项目(牧草温带备份库的维护与备份繁殖入库2009-13) 

出 版 物：《华北农学报》 (Acta Agriculturae Boreali-Sinica)

年 卷 期：2010年第25卷第6期

页      码：97-103页

摘      要：以扁蓿豆(Medicago ruthenica)为试材,采用改良的CTAB法提取DNA,利用正交设计L16(45)探讨10×PCRBuffer(含Mg2+)、dNTPs、引物、TaqDNA聚合酶及模板DNA用量对扁蓿豆ISSR-PCR反应的影响,正交试验的结果采用直观分析和方差分析相结合。建立了扁蓿豆的ISSR-PCR优化反应体系,在25μL反应体系中,TaqDNA聚合酶1.5U,10×PCR Buffer(含Mg2+)2.0 mmol/L,模板DNA0.5 ng/μL,dNTPs 0.6 mmol/L,引物0.9μmol/L。同时探讨引物HZD09211的最适退火温度为52.3℃。2个不同引物对20份扁蓿豆材料DNA进行ISSR-PCR扩增,结果显示该体系具有较高的稳定性。

主 题 词：扁蓿豆 ISSR 正交设计 反应体系 优化 

学科分类：09[农学] 0901[农学-植物生产类] 

核心收录：

馆 藏 号：203226063...