Jab1靶向shRNA质粒构建及其对Hep-2细胞目的基因沉默效应

作     者：李海霞 曹华 LI Haixia;CAO Hua

作者机构：郑州大学第一附属医院耳鼻咽喉科河南郑州450052 河南大学淮河医院耳鼻咽喉科河南开封475000 

出 版 物：《中国耳鼻咽喉头颈外科》 (Chinese Archives of Otolaryngology-Head and Neck Surgery)

年 卷 期：2011年第18卷第6期

页      码：295-297页

摘      要：目的利用RNA干扰技术构建Jab1基因靶向shRNA质粒,观察目的基因沉默效应及对人喉鳞状细胞癌细胞株Hep-2细胞(简称Hep-2细胞)的影响。方法设计合成以Jab1基因为靶向目标的shRNA,将其定向克隆到真核表达载体pGenesill.1中形成重组质粒,利用脂质体介导的方法将质粒转染至Hep-2细胞,通过WST-8、Western blot的方法对细胞凋亡及蛋白水平表达变化进行检测,分析shRNA干扰质粒对喉鳞状细胞癌细胞(简称喉癌细胞)的影响。结果成功构建了Jab1基因靶向的pJab1以及阴性对照pKB真核重组质粒。WST-8结果显示pJab1重组质粒能显著抑制Hep-2细胞的增殖活性,与对照组相比具有显著性差异(P<0.001)。Western blot结果显示Hep-2-pJab1细胞Jab1蛋白表达量明显降低,p27蛋白表达量明显升高,与对照组相比差异显著(P<0.001)。结论构建靶向Jab1癌基因的shRNA干扰质粒能够下调Jab1基因的表达,上调p27基因的表达,抑制Hep-2细胞在体外的增殖。

主 题 词：喉肿瘤 RNA干扰 细胞凋亡 质粒 转染 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.16066/j.1672-7002.2011.06.008

馆 藏 号：203226240...