利用CRISPR-Cas9系统敲除小鼠黑色素瘤细胞系MATP基因的初步研究

作     者：殷慧慧 李丹 李钰 孙菲 董施施 孔江峰 王洪宝 曾林 法云智 孙兆增 YIN Hui-hui;LI Dan;Li Yu;SUN Fei;DONG Shi-shi;KONG Jiang-feng;WANG Hong-bao;ZENG Lin;FA Yun-zhi;SUN Zhao-zeng

作者机构：军事医学科学院实验动物中心北京100071 

基　　金：国家自然科学基金31272387 全军实验动物专项课题SYDW006 

出 版 物：《中国比较医学杂志》 (Chinese Journal of Comparative Medicine)

年 卷 期：2017年第27卷第4期

页      码：52-55页

摘      要：目的利用CRISPR/Cas9系统,敲除小鼠黑色素瘤细胞系的MATP基因,为MATP基因的功能研究奠定基础。方法利用http://***/网站,设计针对MATP的特异性引物,并将引物链接到pCAS9/gRNA1载体。将阳性载体转染小鼠黑色素瘤细胞系B16F10,利用无限稀释的方法获得转染后的单克隆细胞株。提取不同细胞株的基因组,通过测序的方法进一步筛选出发生MATP基因切割的细胞株,并利用Western-blot的方法验证MATP的表达情况。结果成功获得了3株MATP基因敲除的细胞株,Western-blot结果表明,该细胞株不表达MATP蛋白。结论利用pCAS9/gRNA1载体,可以实现B16F10细胞系MATP基因的敲除。

主 题 词：CRISPR-Cas9 黑色素瘤细胞 MATP 研究 

学科分类：1001[医学-基础医学] 10[医学] 

馆 藏 号：203226496...