虾过敏原Troponin C(Pen m6)的克隆表达、免疫学鉴定及生物信息学分析

作     者：梁志林 孙宝清 叶小英 郭丹 叶佩莹 孙雯阳 刘志刚 陈同强 LIANG Zhi-Lin;SUN Bao-Qing;YE Xiao-Ying;GUO Dan;YE Pei-Ying;SUN Wen-Yang;LIU Zhi-Gang;CHEN Tong-Qiang

作者机构：赣南医学院基础医学院组胚教研室赣州341000 深圳大学过敏反应和免疫学研究所深圳518060 广州医科大学附属第一医院广州510120 

基　　金：国家自然科学基金项目(81460252) 广东省对外科技合作项目(2013B051000088) 深圳市科技计划基础研究项目(JCYJ20140828163633991)~~ 

出 版 物：《食品安全质量检测学报》 (Journal of Food Safety and Quality)

年 卷 期：2017年第8卷第4期

页      码：1154-1159页

摘      要：目的对斑节对虾(Penaeus monodon)第6组过敏原(Pen m6),肌钙蛋白C(Troponin C)进行克隆表达、免疫学鉴定并研究其生物学意义。方法提取斑节对虾总RNA;根据Gen Bank:HM034316.1设计引物及构建表达载体PET-24a-Pen m6;转化至大肠杆菌BL21(DE3)进行表达;纯化后的重组Pen m6用Western bolt来鉴定免疫学特性;用生物信息学相关工具对Pen m6进行同源性分析,并预测其蛋白质的结构和功能。结果克隆出斑节对虾Pen m6基因开放阅读框453 bp,编码150个氨基酸。重组Pen m6蛋白呈可溶性,分子量约35kDa,能够与斑节对虾过敏患者血清IgE结合。斑节对虾与凡纳滨对虾亲缘关系比较近,其中斑节对虾Pen m6蛋白与凡纳滨对虾Troponin C1(gb|AET36896.1|)同源性为98%。理化性质预测Pen m6蛋白质不稳定。蛋白质结构预测结果显示Pen m6的结构主要以α螺旋组成。T细胞抗原表位预测得到4个肽序列(15~23、35~43、91~99、112~120)。B细胞抗原表位预测得到4个肽序列(7~16、21~30、28~37、58~67)。结论克隆的重组斑节对虾Pen m6蛋白具有良好的免疫原性,为进一步研究斑节对虾过敏原的结构成分及其理化性质奠定理论基础。

主 题 词：斑节对虾 Troponin C(Pen m6) 原核表达 免疫学特性 生物信息学 

学科分类：0831[工学-公安技术类] 0711[理学-心理学类] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 08[工学] 100201[100201] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.2095-0381.2017.04.013

馆 藏 号：203228876...