AIV PB2基因靶向性M1GS核酶的构建及其体外切割活性测定

作     者：李小英 伍婧茹 刘琳 张文军 LI Xiaoying;WU Jingru;LIU Lin;ZHANG Wenjun

作者机构：广东药科大学基础学院广东广州510006 

基　　金：广东省自然科学基金项目(S2012010009471) 病毒学国家重点实验室开放基金项目(2012008) 

出 版 物：《广东药科大学学报》 (Journal of Guangdong Pharmaceutical University)

年 卷 期：2017年第33卷第1期

页      码：103-107页

摘      要：目的针对禽流感病毒(AIV)复制酶PB2亚基的基因构建具有靶向切割作用的M1GS核酶,为新型抗AIV反义药物的开发奠定基础。方法基于大肠埃希菌的核糖核酸酶P(RNase P),根据AIV PB2基因的序列特征,设计一小段与之互补的引导序列GS,通过PCR技术将其共价连接至大肠埃希菌RNase P催化性亚基(M1 RNA)的3 末端,以构建靶向性M1GS核酶。通过体外切割试验测定M1GS核酶的活性。结果构建了M1GS-T_(436)、M1GS-C_(341)两种M1GS核酶。体外切割实验证实,核酶M1GS-T_(436)可对靶RNA片段产生特异性切割;核酶M1GS-C_(341)虽可切割靶RNA片段,但可能属于非特异性切割。结论成功构建并筛选出一种具有显著体外切割活性的M1GS核酶(M1GS-T_(436)),为今后进一步研究其胞内及体内抗病毒活性奠定了基础。

主 题 词：M1GS核酶 禽流感病毒 PB2基因 抗病毒 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.16809/j.cnki.2096-3653.2016111601

馆 藏 号：203230120...