猪细环病毒数字PCR定量检测方法的建立

作     者：杨春华 孙洁 罗秋红 祝建新 孙思扬 周延 钟毅 夏彪 Yang Chunhua;Sun Jie;Luo Qiuhong;Zhu Jianxin;Sun Siyang;Zhou Yan;Zhong Yi;Xia Biao

作者机构：江西出入境检验检疫局江西南昌330002 深圳出入境检验检疫局广东深圳518045 南昌大学江西南昌330002 

基　　金：江西省科技计划项目(20151BBF60048) 

出 版 物：《中国动物检疫》 (China Animal Health Inspection)

年 卷 期：2017年第34卷第4期

页      码：80-85页

摘      要：[目的]实现猪细环病毒(TTSuV)的准确定量检测。[方法 ]根据TTSuV的序列特点,设计特异性引物、探针,建立数字PCR检测技术。对数字PCR反应体系中的引物和探针浓度进行优化,分析方法的灵敏度、特异性,并初步应用于进行临床检测。[结果 ]最终确定TTSuV1a和TTSuV1b数字PCR反应体系中最佳引物浓度均为250 nmol/L,最佳探针浓度均为300 nmol/L,TTSuV1a型和TTSuV1b型灵敏度均可达到单个拷贝数;以猪圆环病毒Ⅱ型、猪细小病毒和猪伪狂犬病毒进行特异性试验,结果无交叉反应;批内和批间试验表明,该方法的重复性良好;本实验室留存的92份血清样本的检测结果与其背景信息一致。[结论 ]本研究建立的TTSuV数字PCR法具有特异性强、灵敏度高、检测限低等优点,可用于TTSuV的定量检测。

主 题 词：猪细环病毒 实时荧光PCR 数字PCR 

学科分类：090602[090602] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-944X.2017.04.024

馆 藏 号：203230455...