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双重荧光定量PCR检测志贺毒素stx1和stx2基因

双重荧光定量PCR检测志贺毒素stx1和stx2基因

作     者:陆芸 王若南 谢国良 余斐 郑书发 陈晓 LU Yun;WANG Ruonan;XIE Guoliang;YU Fei;ZHENG Shufa;CHEN Xiao

作者机构:浙江大学医学院附属儿童医院检验科浙江杭州310052 浙江大学医学院附属第一医院检验科浙江省临床体外诊断技术研究重点实验室浙江杭州310003 浙江大学传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心浙江杭州310003 

基  金:国家科技重大专项“传染病监测技术平台”项目(2012ZX10004-210) 

出 版 物:《中国微生态学杂志》 (Chinese Journal of Microecology)

年 卷 期:2017年第29卷第5期

页      码:591-593,597页

摘      要:目的建立一种双重荧光定量PCR检测志贺毒素stx1和stx2基因的方法。方法根据不同细菌来源的stx1和stx2序列,设计PCR引物和TaqMan探针,建立双重实时荧光定量PCR检测体系,进行灵敏度、特异性和重复性评价,并对腹泻患者粪便样本进行检测分析。结果双重实时荧光定量PCR检测含志贺毒素基因重组质粒的最低检测下限为102 copies/mL;该法对12种常见肠道病原菌均无特异性扩增,对不同浓度的标准质粒检测重复性高,Ct值变异系数均小于10%;对急性腹泻粪便标本的检测阳性率高于细菌分离培养。结论建立的双重实时荧光定量PCR可作为不同细菌来源的志贺毒素基因的快速鉴定方法,亦可用于人感染性腹泻标本的快速筛查。

主 题 词:志贺毒素 stx1 stx2 实时荧光定量PCR 

学科分类:1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D O I:10.13381/j.cnki.cjm.201705024

馆 藏 号:203230650...

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