Kruppel样因子6对肝癌HepG2细胞的作用及其缺失对斑马鱼肝脏发育的影响

作     者：陈浩 杨振国 伍水龙 邬永富 冯瑜菲 高晓霞 包仕廷 张晶晶 CHEN Hao;YANG Zhen-guo;WU Shui-long;WU Yong-fu;Feng Yu-fei;GAO Xiao-xia;BAO Shi-ting;ZHANG Jing-jing

作者机构：广东医科大学附属医院广东湛江524001 广东医科大学广东湛江524023 

基　　金：广东省科技计划项目(2013B060300021) 广东省"培养高层次人才特殊支持计划"专项基金(粤人才办8号) 广东省高等学校优秀青年教师培养计划(YQ2015081) 广东医科大学科研基金(XK1418) 

出 版 物：《中国比较医学杂志》 (Chinese Journal of Comparative Medicine)

年 卷 期：2017年第27卷第5期

页      码：42-50页

摘      要：目的探讨Kruppel样因子6(KLF6)低表达对肝癌细胞凋亡及迁移能力的影响,并以斑马鱼作为动物模型,研究klf6基因沉默对肝脏发育的作用。方法构建敲除KLF6基因质粒,转染肝癌细胞(HepG2)及正常人肝细胞(L-02),通过免疫印迹(WB)、凋亡及细胞周期测定、划痕实验检测KLF6基因敲除后对HepG2细胞的影响;设计合成沉默KLF6基因的吗啉代寡核苷酸(Morpholino),显微注射入转基因斑马鱼Tg(lfabp:e GFP)胚胎中,通过免疫荧光法观察KLF6蛋白表达的变化以及对转基因斑马鱼胚胎肝脏发育表型的影响。结果体外实验表明,L-02细胞中的KLF6蛋白的表达量明显高于HepG2细胞;敲除KLF6基因后,HepG2细胞KLF6蛋白表达明显减少、凋亡减弱、细胞周期主要集中于S期、迁移能力增强;体内实验表明,klf6基因沉默后,斑马鱼胚胎肝脏中的KLF6蛋白表达量减少,肝脏发育明显迟缓。结论 KLF6基因低表达促进肝癌细胞的增殖和迁移能力,减少凋亡;且影响斑马鱼肝脏的正常发育。探讨KLF6基因低表达及其功能,可为以后斑马鱼肝癌模型建立及药物筛选提供理论基础。

主 题 词：KLF6基因 HepG2细胞 斑马鱼 Morpholino 

学科分类：10[医学] 

馆 藏 号：203230682...