KCTD10基因干扰RNA慢病毒载体的构建

作     者：丰昀 张敏 彭文婷 李映蓉 杨倩 蒋乐龙 王光伟 Feng Yun;Zhang Min;Peng Wen-ting;Li Ying-rong;Yang Qian;Jiang Le-long;Wang Guang-wei

作者机构：长沙市中心医院眼科长沙410004 湖南医药学院怀化418000 

基　　金：湖南省自然科学基金项目(No.2015JJ4036) 湖南省教育厅科研重点项目(15A134) 

出 版 物：《湖南师范大学学报（医学版）》 (Journal of Hunan Normal University(Medical Sciences))

年 卷 期：2017年第14卷第2期

页      码：9-12页

摘      要：目的:构建KCTD10干扰RNA慢病毒载体。方法:合成KCTD10干扰序列,构建GV248-KCTD10-RNAi慢病毒干扰载体,利用PCR与测序验证阳性克隆。将KCTD10 siRNA干扰病毒载体与质粒pHelper1.0和质粒pHelper2.0三个载体共同转染293T细胞,使细胞合成并分泌释放病毒颗粒。收集病毒颗粒并检测病毒滴度。结果:GV248-KCTD10-RNAi慢病毒载体成功被连接转化,测序结果与设计序列一致;共转后收获KCTD10 siRNA慢病毒颗粒,检测其滴度为5×10~8TU/mL。结论:成功包装了KCTD10 siRNA慢病毒颗粒,为后续进一步研究KCTD10基因在糖尿病视网膜病变中的作用奠定了基础。

主 题 词：糖尿病视网膜病变 KCTD10 慢病毒载体 干扰RNA 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 100212[100212] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-016X.2017.02.003

馆 藏 号：203230744...