金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和肺炎克雷伯杆菌多重PCR方法的建立与初步应用

作     者：祝岩波 郑龙 尤红煜 王璇 梁晓亮 刘健敏 张东明 连伟光 栗彦宁 王俊霞 ZHU Yan-bo;ZHENG Long;YOU Hong-yu;WANG Xuan;LIANG Xiao-liang;LIU Jian-min;ZHANG Dong-ming;LIAN Wei-guang;LI Yan-ning;WANG Jun-xia

作者机构：河北省实验动物重点实验室河北医科大学实验动物学部石家庄050000 河北医科大学第二医院石家庄050000 

基　　金：国家科技支撑计划(2015BAI07B02-05) 

出 版 物：《中国比较医学杂志》 (Chinese Journal of Comparative Medicine)

年 卷 期：2017年第27卷第5期

页      码：94-98页

摘      要：目的建立金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和肺炎克雷伯杆菌多重PCR检测方法,为实验动物细菌检测提供快速、灵敏、简便的方法。方法根据金黄色葡萄球菌nuc基因、绿脓杆菌Las I基因、肺炎克雷伯杆菌Pho E基因和细菌通用16S rRNA基因设计出特异性引物;经过多重PCR引物浓度和退火温度的优化,特异性和敏感性的检测,建立多重PCR体系。应用该PCR体系对人工感染标本、实验动物粪便样本进行验证检测,与传统检测方法对比。结果多重PCR分别扩增出金黄色葡萄球菌(153 bp)、绿脓杆菌(600 bp)、肺炎克雷伯杆菌(368 bp)和通用(520 bp)的目的条带。多重敏感性为10 pg,特异性检测未从其他细菌中检测出目的条带。应用建立的多重PCR体系检测出不同组合的人工感染标本,从76只粪便检测出绿脓杆菌阳性1例,与传统检测方法结果一致。结论本文建立的多重PCR方法具有特异、灵敏、简便、快速等优点,为实验动物微生物的快速检测提供了可靠的方法。

主 题 词：金黄色葡萄球菌 绿脓杆菌 肺炎克雷伯杆菌 多重PCR 

学科分类：10[医学] 

馆 藏 号：203230886...