利用结构优化的TALE-TF高效诱导MEF细胞内源基因Oct4的表达（英文）

作     者：吴芸 张志强 李铎 徐坤 韩芙蓉 任充华 闫强 王昕 张智英 WU Yun;ZHANG Zhi-Qiang;LI Duo;XU Kun;HAN Fu-Rong;REN Chong-Hua;YAN Qiang;WANG Xin;ZHANG Zhi-Ying

作者机构：西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100 遵义师范学院生物与农业科技学院贵州遵义563000 

基　　金：Supported by Scientific and Technological Project of Shaanxi Province,China(No.2014K02-07-01) China Postdoctoral Science Foundation(No.2015M580887)~~ 

出 版 物：《中国生物化学与分子生物学报》 (Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology)

年 卷 期：2017年第33卷第5期

页      码：461-469页

摘      要：转录激活子样效应因子核酸酶(TALENs)已用于基因组编辑,而TALE转录激活因子(TALE-TFs)可用于内源基因的调控。通过修饰的TALE蛋白与内源基因的启动子特异性结合来激活或抑制基因的表达。但是,对于截短了N端的TALE是否会影响TALENs的效率还不确定。本文设计了不同长度N端的TALENs哺乳动物及酵母表达载体,对应哺乳动物绿色荧光报告载体及酵母报告载体。分别在哺乳动物细胞和酵母细胞上对不同长度N端TALENs的活性进行了检测。检测结果发现,含120个氨基酸N端的TALEN在酵母AH109细胞中的活性最高,N端长度为153个氨基酸的TALENs在293T细胞中表现最高的活性,但N端长度为153、140和160个氨基酸的TALENs的活性差异不显著(P>0.05)。随后,将结构优化了的TALE-TF用于小鼠胎儿成纤维细胞中激活Oct4基因。相对阴性对照组,TALE-TF将Oct4基因表达量上调了418倍。本研究结果表明,在哺乳动物细胞和酵母细胞中,具有最高活性TALENs的N端长度是不同的。本研究用结构优化的TALE-TF诱导内源基因高水平的表达,为从体细胞中获得iP S细胞提供了研究策略。

主 题 词：TALE-N端 转录激活子样效应因子核酸酶(TALENs) Oct4基因 TALE转录激活因子(TALE-TF) 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.13865/j.cnki.cjbmb.2017.05.07

馆 藏 号：203231004...