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兔抗人MIG7多克隆抗体的制备和纯化

兔抗人MIG7多克隆抗体的制备和纯化

作     者:余飞 盛冠男 陈冠男 王宇鹏 宁莉莉 屈波 Yu Fei;Sheng Guannan;Chen Guannan;Wang Yupeng;Ning Lili;Qu Bo

作者机构:锦州医科大学武警后勤学院附属医院培养基地武警后勤学院附属医院肿瘤外科天津300162 天津市北辰医院肿瘤科天津300400 

基  金:国家自然科学基金面上项目(编号:81272547) 

出 版 物:《现代肿瘤医学》 (Journal of Modern Oncology)

年 卷 期:2017年第25卷第11期

页      码:1708-1712页

摘      要:目的:构建、表达迁移诱导蛋白7(migration-inducing protein 7,MIG7),制备该融合蛋白的兔多克隆抗体,纯化并鉴定该多克隆抗体。方法:设计并合成MIG7蛋白特异性多肽片段,合成的MIG7多肽与马来酰胺活化匙孔血蓝蛋白(KLH)偶联,构建半抗原-载体偶联物。以MIG7特异性多肽-KLH为抗原免疫大白兔,制备抗MIG7多克隆抗体。40%硫酸铵沉淀、甘氨酸溶液洗脱纯化抗体,Dot blot检测抗体血清效价。免疫组化与qRT-PCR验证MIG7抗体。结果:免疫组织化学染色与qRT-PCR检测结果一致,证明该抗体可特异性结合MIG蛋白,获得MIG7多克隆抗体。结论:本研究成功制备并纯化了特异性较高的抗MIG7多克隆抗体,为进一步研究MIG7在血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)形成和肝癌侵袭转移中的机制奠定了基础。

主 题 词:迁移诱导蛋白7 多克隆抗体 血管生成拟态 肝癌 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D O I:10.3969/j.issn.1672-4992.2017.11.007

馆 藏 号:203231725...

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