烟草orf25基因RNAi表达载体的构建及遗传转化

作     者：钟思荣 谢丽娟 陶瑶 吴凌敏 聂亚平 周玮 王建革 刘齐元 

作者机构：江西农业大学农学院作物生理生态与遗传育种教育部重点实验室江西省作物生理生态与遗传育种重点实验室南昌330045 南昌职业学院南昌330045 湖南农业大学植物保护学院植物病虫害生物学与防控湖南省重点实验室长沙410128 江西农业大学园林与艺术学院南昌330045 

基　　金：国家自然科学基金项目(31260350 31301388) 中国博士后科学基金(2015T8087 2014M562109) 江西省教育厅科技计划项目(GJJ13275)共同资助 

出 版 物：《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期：2017年第15卷第5期

页      码：1724-1731页

摘      要：杂种优势的利用可以有效地实现烟草高产、高抗、优质的育种目标,目前,培育雄性不育系是获取杂种烟草最有效的途径。研究发现orf25基因位于线粒体基因组中,与烟草雄性不育密切相关。本研究以烟草雄性不育相关基因orf25为研究对象,根据RNA干扰载体构建原则,将长度为606 bp的orf25基因干扰片段分别以正向、反向连接到大小为190 bp的linker连接片段的两侧,构成发夹结构的RNA干扰载体片段。将RNA干扰载体片段插入到中间载体pET30a上,最后克隆到植物表达载体pCAMBIA1301中,成功构建orf25基因的RNAi表达载体。利用农杆菌介导法将pCAMBIA1301-orf25-RNAi转入到烟草保持系中烟90中,经抗性筛选以及分子检测最终获得35株转pCAMBIA1301-orf25-RNAi烟草植株,其中阳性烟草有18株,转化率为51.4%。结果表明pCAMBIA1301-orf25-RNAi干扰载体已成功转入到烟草中烟90中。

主 题 词：烟草 orf25基因 RNAi载体构建 遗传转化 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.13271/j.mpb.015.001724

馆 藏 号：203232088...